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BGTurbo®無(wú)甘油,重組β-葡萄糖醛酸酶

 更新時(shí)間:2019-09-19 點(diǎn)擊量:1702

 

kurabiotec BGTurbo說(shuō)明書(shū)

BGTurbo®無(wú)甘油,重組β-葡萄糖醛酸酶

Glycerol Free, High Efficiency Recombinant β-Glucuronidase

在自然界中已鑒定出超過(guò)8,000種不同的β-葡糖醛酸糖苷酶。只有一種能夠在短短10分鐘內(nèi)催化所有葡萄糖醛酸苷的*水解,那就是BGTurbo®。

我們精心研制BGTurbo ®使用大量的蛋白質(zhì)模型和濕實(shí)驗(yàn)室篩查,以創(chuàng)建一個(gè)大規(guī)模優(yōu)化的β葡萄糖醛酸酶,不僅提供存在任何已知的酶的快的水解,而且還通過(guò)消除不必要的轉(zhuǎn)換和減少保存標(biāo)本和峰值完整性背景噪音。

重組,率BGTurbo ®大化LCMS生產(chǎn)能力和報(bào)酬率的投資,兼容將全線自動(dòng)化,并且既非常純凈,幾乎*一致。

我們需要為您提供適合的水解,以便您可以依靠您的答案為人們做多的事情。這就是BGTurbo ®為您提供。

 

產(chǎn)品規(guī)格

  • 產(chǎn)品形式:  液體,pH 7.0
  • 溫度范圍: 20-55°C
  • 宜溫度: 50°C
  • pH范圍: 6.5-7.2
  • 宜pH值: 6.8
  • 比活度: ≥200,000U/ mg蛋白質(zhì)
  • 蛋白質(zhì): 1.0±0.05mg / ml
  • 純度: > 90%β-葡萄糖醛酸酶
  • 分子量: ~280KDa
  • 儲(chǔ)存/穩(wěn)定性: 4°C至少10個(gè)月。
  • 活性單位定義:在pH 6.8和37℃(測(cè)定30分鐘)下,一個(gè)單位每小時(shí)從酚酞葡糖苷酸中釋放1.0μg酚酞。

產(chǎn)品概述:

BGTurbo®重組β-葡萄糖醛酸酶,為廣泛的共軛分析物提供高的水解活性,包括“難以裂解”的葡萄糖醛酸苷,特別是阿片類(lèi)和阿片類(lèi)藥物如可待ying。這種超純水性酶制劑可用于要求苛刻的高通量,臨床或法醫(yī)尿液藥物檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室。使用BGTurbo®進(jìn)行快速水解和樣品制備,可以消除樣品制備瓶頸,同時(shí)實(shí)現(xiàn)全自動(dòng)水解和當(dāng)天報(bào)告的準(zhǔn)確和可重復(fù)的分析結(jié)果。

工作溫度范圍:20 - 55°C蛋白:1.0±0.05mg / ml
工作pH范圍:6.5 - 7.2純度:> 90%β-葡萄糖醛酸酶
具體活動(dòng)(PPG):> 200,000U / mg蛋白質(zhì)存儲(chǔ):在-20°C,至少保證10個(gè)月。

表1:BGTurbo孵育條件

 

阿片類(lèi)藥物和阿片類(lèi)藥物,ULOQ高達(dá)15,000ng / mLB Opiate /阿片類(lèi)藥物,ULOQ高達(dá)2,500ng / mL和廣譜面板C其他:苯二氮卓類(lèi),(合成)大麻素,三環(huán)類(lèi)抗抑郁藥......
BGT:尿液(v / v)1:12:51:5
時(shí)間(min)10分鐘10分鐘瞬間
溫度(°C)55℃下55℃下室內(nèi)溫度
預(yù)計(jì)恢復(fù)> 85%的> 90%的> 95%

 

逐步協(xié)議:

  1. 可選的尿液標(biāo)本離心。
  2. 根據(jù)表2移取尿量。
  3. 根據(jù)表2,在50%甲醇(MeOH)+去離子水中加入Buffer +BGTurbo®酶+內(nèi)標(biāo)(ISD)。
  4. 在的溫度和時(shí)間進(jìn)行水解孵育。
  5. a)對(duì)于D&S方法,添加曲線 - 稀釋劑并立即注射(無(wú)離心)或b)進(jìn)行F&S,SPE或SLE提取。

表2:水解混合物組合物(LCMS / MS的實(shí)施例)請(qǐng)參考下面的圖例。

 abC
 樣品制備(a)D&S(μL)F&S / SPE / SLE(μL)D&S(μL)F&S / SPE / SLE(μL)D&S(μLF&S / SPE / SLE(μL)
 尿501005010050100

MASTERMIX(d)

緩沖區(qū)(B)204020402040
BGTurbo5010020401020
DI-水15三十459055110
ISDs含50%MeOH(c)15三十15三十15三十
 150300150300150300
 孵化時(shí)間10分鐘10分鐘0分鐘
 TemperatureTime55℃下55℃下室內(nèi)溫度

 

  • 樣品制備方法:D&S稀釋和射出/ F&S過(guò)濾和射出/ SPE固相萃取/ SLE:支持液體萃取
  • 緩沖液:  磷酸鈉500mM。pH 6.8或Kura Biotec提供緩沖液。
  • 50%甲醇中的內(nèi)標(biāo)物:總水解混合物中4%至6%MeOH是宜的并且使BGTurbo活化達(dá)1.6倍。
  • 可以制備含有50%MeOH中的緩沖液,酶,去離子水和ISD的Mastermix以簡(jiǎn)化工作流程。儲(chǔ)存在2-8°C。5天內(nèi)使用。

 

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